一、服務(wù)簡介
細(xì)胞周期（Cell Cycle）是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程，細(xì)胞的遺傳物質(zhì)復(fù)制并均等地分配給兩個子細(xì)胞。細(xì)胞周期分為間期與分裂期兩個階段。間期又分為三期：即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）與DNA合成后期（G2期）。某些細(xì)胞在分裂結(jié)束后暫時離開細(xì)胞周期，停止細(xì)胞分裂，執(zhí)行一定生物學(xué)功能（G0期）。 流式細(xì)胞儀的工作原理是將待測細(xì)胞放入樣品管中，在氣體的壓力下進(jìn)入充滿鞘液的流動室。在鞘液的約束下細(xì)胞排成單列由流動室的噴嘴噴出，形成細(xì)胞柱。通過對流動液體中排列成單列的細(xì)胞進(jìn)行逐個檢測，得到該細(xì)胞的光散射和熒光指標(biāo)，分析出其體積、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、DNA、RNA、蛋白質(zhì)、抗原等物理及化學(xué)特征。
細(xì)胞內(nèi)的DNA含量隨細(xì)胞周期進(jìn)程發(fā)生周期性變化，如G0/G1期的DNA含量為2C，而G2期的DNA含量是4C。利用PI標(biāo)記的方法，通過流式細(xì)胞儀對細(xì)胞內(nèi)DNA的相對含量進(jìn)行測定，可分析細(xì)胞周期各時相的百分比。
二、技術(shù)流程 1、取對數(shù)生長期細(xì)胞，倒去培養(yǎng)液，胰酶適度消化細(xì)胞，用培養(yǎng)液吹打，800 rpm，離心 15 min去上清。
2、PBS洗2次，加0.5 mL PBS吹勻，務(wù)必吹散。
3、用5 mL注射器將細(xì)胞吸起，用力打入5 mL 70%(預(yù)冷)乙醇中，封口膜封口。4℃固定過夜（可長至2周）。
4、800 rpm 15 min收集固定細(xì)胞，PBS洗2次。
5、用0.4 mL PBS重懸細(xì)胞并轉(zhuǎn)至Tube中輕輕吹打（防止細(xì)胞破碎）。
6、加RNase-A約3 μL至終濃度約為50 μg/mL ，37℃水浴消化30 min；
七、加PI約50 μL至終濃度約為65 μg/mL ，在冰浴中避光染色30 min。
八、用300目（孔徑40~50微米）尼龍網(wǎng)過濾，上機(jī)檢測。
九、樣品分析測定及打印。
三、服務(wù)說明 1、 客戶提供：狀態(tài)良好的受試細(xì)胞；
2、實(shí)驗(yàn)周期：1-2周；
3、明確檢測時間
4、提供流式原文件
四、成果展示
五、詢價及訂購
感謝您選擇我公司的流式檢測細(xì)胞周期服務(wù)。如有相關(guān)問題請聯(lián)系我們的工作人員。